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Il mwbwMetil Red Voges Proskauer Medium (mwcaMR-VP) è un mwcqterreno differenziale sviluppato da Clark e Lubs utilizzato per differenziare gli mwcgenterobatteri. Il MR-VP contiene 3 sostanze fondamentali per la crescita degli organismi batterici quali mwcwpeptone, mwdaglucosio e K2HPO4. I mwdqbatteri MR positivi (come l’mwdgmwdwEscherichia coli) hanno la capacità di fermentare il mweaglucosio con produzione di mweqacido lattico, mwegacido succinico, mwewacido acetico e mwfaacido formico; Questi prodotti metabolici, hanno la particolarità di restare stabili durante l'mwfqincubazione e produrre così un alto tasso di ioni mwfgidrogeno. I batteri MR negativi (come gli mwfwmwgaEnterobacter aerogenes) hanno la capacità di produrre acido lattico, acido acetico e acido formico; questi prodotti metabolici, hanno la particolarità di non restare stabili durante l'incubazione e produrre così un basso tasso di ioni Idrogeno, essi vengono trasformati in mwgqcarbonati e mwgganidride carbonica. L'mwgwacido acetico, a mwhapH 6,3 viene convertito in mwhqacetoina o in 2-3 butilenglicol. A volte si ottiene un'inversione alcalina del terreno a causa delle mwhwproteine che effettuano un attacco catabolico con produzione di composti ammoniacali. Si possono differenziare i 2 risultati, tramite l'aggiunte dell'indicatore mwiarosso fenolo, che si colora a seconda dell'mwiqacidità delle sostanze prodotte (rosso o giallo). Nella prova VP, si differenziano i mwigmicrorganismi che fermentano il glucosio con produzione di sostanze acidi o con produzione di acetoina (metilacetilcarbonolo). L'acetoina, presente nella mwjacolture, è ossidato a mwjqdiacetile dall'mwjgossigeno atmosferico, in un ambiente reso alcalino all'aggiunta del secondo reagente: KOH 0,2mL (mwjwidrossido di potassio). Il diacetile, reagisce con il primo reagente aggiunto: l'a-naftolo 0,5mL e si produrrà una colorazione rossa per le reazioni positive e marrone per le reazioni negative. I reattivi devono essere severamente aggiunti nell'ordine seguente, prima a-naftolo solubilizzato in alcol etilico a freddo, poi la base solubilizzata in acqua fredda.

• Impiego

• Esecuzione del Test Rosso Metile (MR)

• Esecuzione del test Voges Proskauer (VP)

• Conservazione

• Precauzione e sicurezza degli operatori

• Voci correlate

Per poter effettuare i 2 test, bisogna prima di tutto seminare (inoculo) un ceppo puro nell'MR-VP, tramite stemperamento. Per il mwlqTest del rosso metile (MR), bisogna attendere 5 giorni di incubazione a 30 °C, per il mwlgTest di Voges Proskauer (VP), bisogna 24 ore a 35 °C.

A 5 mL di brodocultura in MR-VP Medium aggiungere 5 gocce di rosso metile. Per preparare la soluzione di Rosso Metile: in 300 mL di alcool etilico 95% sciogliere 0,1 g di rosso metile e portare a volume 500 mL con mwmqacqua distillata.

Il test, prevede la preparazione delle seguenti soluzioni: 1) creatina monoidrato (N-amidosarcosina): dissolvere 0.5 g in 100 mL in acqua distillata. 2) a-naftolo: sciogliere 6g di a-naftolo in 100 mL di alcool etilico 96% (V/V). Preparare la soluzione il giorno del test. 3) KOH: sciogliere 40g di KOH in 100 mL di acqua distillata. A 3 mL di brodocultura aggiungere 2 gocce di creatina, 3 gocce di soluzione a-naftolo e 2 gocce di KOH. La positiva del test dallo sviluppo di una colorazione rosa o rosso acceso, dopo aver atteso 15 minuti dall'aggiunta dei mwnqreattivi.

Conservare a 10-30 °C al riparo dalla mwoaluce, in luogo asciutto. In questo modo, il terreno è utilizzabile fino alla data di scadenza indicata sul mwoqbarattolo, ma non utilizzare oltre quella data. In caso che vi sia un evidente deterioramento della polvere (modifica del colore, indurimento della polvere, ecc...).(mwogche cosa bisognerebbe fare?La frase non ha un senso compiuto.) Le provette contenenti il terreno, possono essere conservate per un massimo di 7 giorni a 2-8 °C.

Il terreno (preparato) non è classificato come pericoloso né contiene sostanze pericolose con concentrazioni >1%. Come per tutti i tipi di terreni in polvere, per la sua manipolazione è consigliabile utilizzare una protezione alle vie respiratorie (mascherine o filtri a carboni attivi). Il preparato deve essere utilizzato solo in un laboratorio, in completa mwpqasepsi, per evitare le contaminazioni da parte di agenti patogeni esterni.

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